试剂盒选用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被试剂盒试剂的包被微孔中,顺次参加标本、HRP符号的检测抗原,通过温育并洗刷。用底物TMB显色,TMB在化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终究的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,然后断定标本中金黄色葡萄球菌(S. Aureus)的存在与否。
1. 血清:运用不含热原和内毒素的试管,操作的流程中防止任何细胞影响,搜集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞敏捷小心肠别离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
4. 安排匀浆:将安排参加适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:假如样本搜集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,防止重复冻融,在室温下冻结并保证样品均匀地充沛冻结。
1.试剂盒保存在2-8℃,运用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗刷液会有结晶,这归于正常现象,水浴加热使结晶彻底溶解后再运用。
3.预处理后的样本请依照操作过程用样本稀释液恰当稀释以到达试剂盒的的检测作用。
1.手艺洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗刷液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩下板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中参加阴性对照、阳性对照各50μL;
4.随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔参加辣根化物酶(HRP)符号的检测抗原100μL,用封板膜封住反响孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗刷液,静置1min,甩去洗刷液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
7.每孔参加停止液50μL,15min内,在450nm波利益测定各孔的OD值。
1.准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,阐明试验成果有用。
1.试剂盒仅供研讨运用,不得用于临床试验或试验,不然所发生的全部结果,由试验者承当,本公司概不负责。